小容量移液的技巧和技术

随着现代研究人员越来越多地使用高价值的小容量样品，对先进移液技术/协议的需求是显而易见的。为了准确检测小样本量的微观变化，试管和小瓶正逐渐被微孔板取代，微孔板需要微升/纳升范围内的试剂。

在处理小容量时，温度和分配精度等因素对于控制和操作至关重要。如果您希望在使用少量液体时获得一致的结果，您需要识别并消除所有潜在的错误来源，并定期检查您的实验室工作流程。这适用于因使用错误的移液仪器和不准确的移液技术而导致的错误。以下是准确移液小容量的一些技巧。

使用正确的移液器和移液器吸头

由于容量误差在低样本量时更为突出，因此选择能够提供与研究方案一致的样本量的移液器非常重要。确保选择尽可能小的移液器来处理样品容量。例如，如果您要移取 1 µL 样品，请使用2-5 µL 移液器，而不是 20 µL 移液器。

此外，您需要知道是否为您的工作流程使用了正确类型的移液器。例如，容积式移液器非常适合处理挥发性、粘性和其他类型的难处理样品。建议您在选择适合您的实验需要的移液器类型时阅读制造商的说明手册。实验室报告的大多数错误是由于液体挥发性或粘度以及意外的环境变化引起的。您必须确保您的移液技术与周围条件、样品类型和样品量相一致。

使用正确的移液技术

在使用特定的移液技术处理较小的液体容量时，有各种注意事项。例如，您需要确保将移液器保持在适当的垂直位置，并将移液器从样品容器中笔直拉出，同时避免接触容器的侧面。

对于小于 50 μL 的样品容量，应避免以一定角度握持移液器，因为它会改变液体的吸液量。此外，如果您让移液器吸头接触容器的侧面，它会产生一个芯吸过程，从而降低分配的液体量。

此外，重要的是您在吸液后和从液体中取出吸头之前要始终保持暂停。此外，尝试使用一致的柱塞压力和速度。 平稳地压下柱塞，直到它停止，浸入移液器吸头，然后以恒定速率释放它。建议这样做，因为这样的重复操作可能会产生可重复的结果。

考虑各种环境温度

您需要确保在设计移液工作流程时考虑到各种环境因素，包括实验室的温度、压力和湿度水平。专家建议您不应在低于实验室环境温度的温度下移液小容量。实验室的环境温度将直接影响仪器移液样品的精确容量，因为较高温度引起的热膨胀可能会增加样品和移液器吸头之间的空气空间，并显着减少分液容量。

在实验室环境中平衡小容量样品有助于显着减少容量误差，并防止冷液体的过度分配。此外，您可以在处理极冷或极热的液体时使用正排量移液器，以保持更高水平的精确度和准确度。

预润湿移液器吸头

为了正确吸取和分配小容量样品，您必须在开始移液工作流程之前预先润湿移液器吸头。预润湿主要涉及在执行后续移液步骤之前将移液器吸头浸入液体中。

尽管使用了经过验证的移液技术，但未能预先润湿移液器吸头会导致蒸发增加和输送量减少。预润湿移液器吸头使您能够通过增加腔室内的湿度水平来分配准确和精确的液体量，从而在移液过程中限制液体蒸发。

使用正确的浸入深度

在吸气之前，将吸头正确浸入半月板下方很重要。对于大容量移液器 (1-5 mL)，浸入深度应至少为 5-6 mm，而对于较小容量移液器，深度应在 2-3 mm 左右。

如果您将其浸入得太少，特别是大容量移液器，可能会导致吸入空气。另一方面，如果您将其浸入过多，它会使液体粘在移液器吸头表面，从而导致容量误差。

如果您忽略上述任何变量，错误潜入您的工作流程的机会可能会急剧增加，从而导致结果不可靠。随着样品容量越来越小，其物理特性、环境温度和移液技术的影响变得越来越突出，使得移液工作流程变得相当艰巨。遵循最佳实践并注意几个关键方面可能会改进您的移液技术并帮助您获得所需的高度准确的结果！

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